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如何減少elisa酶聯免疫試劑盒說明書實驗誤差

更新時間:2017-09-20點擊次數:345

用動物組織樣本做elisa酶聯免疫試劑盒實驗,如何確定排除檢測誤差?
為此我們特意請教了公司的資深技術,現將解析公示如下:
   一、定量檢測肯定是選ELISA試劑盒。Westernblot只是一個半定量的實驗方法。
    二、關于排除檢測誤差:
1)實驗人員一定要選好合適的內參,比如可以測目標蛋白/總蛋白,則內參是總蛋白量,如果使用目標蛋白/總組織重量,則很不準確,因為抽提過程的效率不穩定,即每克組織能夠提取出來的蛋白量不固定,而且每個組織含水/含不相干的組織量也不同。
2)zui普通的查驗誤差的辦法,每個試樣多測幾個孔。一般至少兩個,三個更好。確定每個孔讀數一致或非常相近,則知道結果比較可信。
    組織樣本的處理原則:
  1.充分勻漿完成后離心取上清,離心機的轉數選取2000-3000轉每分,轉數不宜超過5000.離心時間為15-30分鐘!
  2.組織在勻漿器勻漿過程中,勻漿液應該分2次加進去,這樣勻漿更充分。
  3.稱取的組織重量不能低于50mg。
  4.勻漿的比例按照10%,即1g組織加9ml的勻漿液,elisa酶聯免疫試劑盒勻漿液一般選取PBS(PH=7.2-7.4)
200mg    甲磺酸非諾多泮標準品    67227-57-0     Fenoldopam Mesylate     甲磺酸非諾多泮標準品    
200mg    甲磺酸多沙唑嗪標準品    77883-43-3    Doxazosin Mesylate    甲磺酸多沙唑嗪標準品    
200mg    甲磺酸多拉司瓊標準品    115956-13-3    Dolasetron Mesylate    甲磺酸多拉司瓊標準品    
200mg    甲睪酮標準品    58-18-4     Methyltestosterone CIII    甲睪酮標準品    
200mg    甲酚曲唑三硅氧烷標準品    155633-54-8    Drometrizole Trisiloxane    甲酚曲唑三硅氧烷標準品    
200mg    甲芬那酸甲芬那酸標準品    61-68-7     Mefenamic Acid     甲芬那酸甲芬那酸標準品    
200mg    甲丙氨酯標準品    57-53-4     Meprobamate CIV    甲丙氨酯標準品      
200mg    甲苯磺丁脲標準品    64-77-7     Tolbutamide     甲苯磺丁脲標準品    
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