細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產品介紹

MHCC-97H細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試，本產品可保持MHCC-97H細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產品中已包含 MHCC-97H細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于MHCC-97H 細胞的培養(yǎng)。

產品主要成分

DMEM 基礎培養(yǎng)基                           445 ml

特級胎牛血清                               50 ml

P/S               5 ml

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

豚鼠白介素10(IL10)試劑盒 ，英文名： IL10 ELISA Kit

Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)試劑盒

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforATGA/TGABELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體

線粒體復合物IV蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次

Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒

Human ansthyretin (T) ELISA Kit 人轉甲狀腺素蛋白(T)試劑盒

HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 人腸三葉因子(ITF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin12,IL-12/P40試劑盒人白介素12(IL-12/P40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性試劑盒20次

HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人糖0脂酰肌醇(GPI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人美洲商陸素(PWM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人脂多糖/內毒素(LPS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

防御素β-125/β-defensin 125抗體

三磷酸腺苷受體受體P2X2抗體

GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype A, strain 92UG037.1) (Fc 標簽) Protein

TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3 0.5mgTGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉移生長因子–β3(抗原)

NAALADL1重組人 NAALADL1 蛋白 Protein

CDNF Protein Human 重組???

MHCC-97H+luc 細胞專用培養(yǎng)基PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標簽)

CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein